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菌片的制备程序

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除垢剂/杀菌灭藻剂/预膜剂/缓蚀阻垢剂/粘泥剥离剂/密闭式缓蚀剂/聚丙烯酰胺/聚合氯化铝等

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1)消毒试验中使用的菌片是以菌液滴加于载体上制成。载体应根据消毒对象选择,常用的有金属、玻璃、滤纸、线、棉布等。根据其特点选择适宜材料载体作为代表。载体可以为方形,大小为 10mm×10mm 当以金属片为载体时,因方形金属载体在振敲时可将玻璃试管撞碎,故改用 12mm 直径圆形金属片(厚 0.5mm)。

2)所用载体(除滤纸片外)于染菌前,应进行脱脂处理。脱脂方法如下:将载体放在含洗涤剂的水中煮沸30 min以自来水洗净;用蒸馏水煮沸 10min用蒸馏水漂洗至 pH 呈中性;晾干、熨平备用。

3)布片用白平纹棉布制作。在剪开前,先将脱脂的布块按载体规定的大小,抽去边缘一周的经纬纱各一根,再按抽纱痕剪开。此法制成的载体大小一致,且无毛边。金属片以不锈钢制作,纸片以新华滤纸制作。

4)载体经压力蒸汽灭菌后,使用滴染法染菌。

染菌用菌悬液:使用TSB营养肉汤配制。细菌繁殖体,可直接使用经18h24h培养的斜面培养物,细菌芽孢可使用4冰箱贮存液。含菌量约为1×108cfu/ml5×108cfu/ml,可使用浊度计调整菌液浓度。

滴染法染菌时,将经灭菌的载体片平铺于无菌平皿内,逐片滴加菌液。菌液滴加量每片为10μl。用10μl移液器接灭菌塑料吸头滴染菌液,并用接种环涂匀整个载体表面。滴染菌液后,染菌载体可置37温箱内干燥(约20min30min),或置室温下自然阴干后再使用。

5)每个菌片的回收菌数,按活菌培养计数所得结果,应为 5×105 cfu/片~5×106 cfu/片。

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