菌悬液与菌片的制备适用范围与试验器材

主营：
除垢剂/杀菌灭藻剂/预膜剂/缓蚀阻垢剂/粘泥剥离剂/密闭式缓蚀剂/聚丙烯酰胺/聚合氯化铝等

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1. 适用范围

制备消毒剂杀菌试验用细菌悬液与菌片，以供消毒剂杀菌试验时使用。

2. 试验器材

（1）菌种:金黄色葡萄球菌ATCC 6538、铜绿假单胞菌ATCC 15442、大肠杆菌8099、枯草杆菌黑色变种ATCC 9372、龟分枝杆菌脓肿亚种ATCC 93326、白色葡萄球菌8032、白色念珠菌ATCC10231、黑曲霉菌ATCC16404。在上述规定的菌株基础上，根据消毒剂特定用途或试验特殊需要，还可增选其他菌株。

（2）有机干扰物：

牛血清白蛋白                                   30g

         蒸馏水                                         1000ml

溶解后用微孔滤膜(孔径为0.45μm)滤过除菌，冰葙保存备用。

（3）磷酸盐缓冲液：

（PBS，0.03mol/L，pH7.2）

无水磷酸氢二钠                    2.83g

磷酸二氢钾                        1.36g

蒸馏水加至                        1000ml

将各成分加入到 1000ml 蒸馏水中，待完全溶解后，调  pH  至 7.2～7.4，于 121℃ 压力蒸气灭菌 20min备用。

（4）无菌蒸馏水。

（5）稀释液：

胰蛋白胨生理盐水溶液（TPS）。

胰蛋白胨                                          1.0g

氯化钠                                            8.5g

先用900ml以上蒸馏水溶解，并调节pH值在7.0±0.2，最终用蒸馏水加至1000ml，分装后，经121℃压力蒸汽灭菌后使用。

（6）细菌培养基：胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA），胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSB）等，见附录A。

（7）革兰染色液：

第1液：结晶紫溶液

结晶紫乙醇饱和溶液                         100ml

结晶紫                                                4g～8g

95%乙醇                                             100ml

1%草酸胺溶液

 

第2液：卢戈碘液

碘化钾                                                   2g

碘                                                          1g

蒸馏水                                                200ml

 

第3液：脱色剂

（1）95%乙醇 

（2）丙酮乙醇溶液                         100ml 

          95%乙醇                                  70ml

     丙酮                                         30ml

 

第4液：稀释石炭酸复红液 

碱性复红乙醇饱和溶液                  10ml 

碱性复红                                         5g～10g 

5%石炭酸溶液                                 90ml 

蒸馏水                                             900ml

（8）芽孢染色液：

第1液  5.0%孔雀绿水溶液 

第2液0.5%沙黄水溶液

（9）恒温水浴箱。

（10）玻璃漏斗。

（11）刻度吸管（1.0ml、5.0ml、10.0ml），毛细吸管。

（12）数字可调移液器（10μl， 20μl， 100μl，200μl，1000μl）及配套用一次性塑料吸头。

（13）离心机。

（14）电动混合器

（15）浊度计。